金数字网站建设,中国最好的公关公司,免费网站建设ppt模板下载,阳东网站seo谷禾健康 病毒-细菌合并或继发感染 引起呼吸道感染的病毒是导致全世界高发病率和死亡率的原因#xff0c;数十年来通常发生在冬季。在冬天#xff0c;空气干燥#xff0c;那些可能含有病毒的飞沫可以在空气中停留更长时间#xff0c;并可以进一步传播。此外人的免疫力在冬季…谷禾健康 病毒-细菌合并或继发感染 引起呼吸道感染的病毒是导致全世界高发病率和死亡率的原因数十年来通常发生在冬季。在冬天空气干燥那些可能含有病毒的飞沫可以在空气中停留更长时间并可以进一步传播。此外人的免疫力在冬季的表现也会不佳。因为纤毛是上呼吸道中微小的毛发状突起通常将异物从鼻子中移出但在较低的温度和较低的湿度下纤毛的功能无法有效发挥作用。 在过去 20 年中世界经历了六次重大传染病爆发SARS-CoV2002-2004 年H1N1 流感2009-2010 年中东呼吸综合征冠状病毒2012-2020 年埃博拉病毒2013-2016 年寨卡病毒 2015-2016 年SARS-CoV-22019 年至今其中四种病毒SARS-CoV、H1N1 流感、MERS-CoV、SARS-CoV-2感染会导致呼吸道感染。 病毒感染尤其是肺部病毒的一项主要并发症是细菌在病毒感染的器官中定植这与高发病率和死亡率有关。虽然继发细菌感染或重复感染很大程度上是原发病毒感染引起的免疫易感性的结果但合并感染是同时发生的多种感染病毒/细菌/酵母。病毒大流行期间合并感染、继发感染或“重复感染”很常见。1918 年西班牙流感大流行导致约 5000 万人死于细菌合并感染其中许多人是由于细菌重复感染导致继发性肺炎。即使在抗生素时代在 1957 年 H2N2 和 1968 年 H3N2 大流行中超过一半的严重感染患者出现细菌并发症。而在 2009 年 H1N1 流感大流行期间高达 34% 的死亡是细菌合并感染造成的。这些并发症在临床记录中常常被忽视。 因此我们需要更好地了解病毒感染后继发细菌性肺炎的发病机制以便在治疗这种破坏性并发症方面取得进展。 病毒后细菌感染的潜在机制很复杂包括由病毒、细菌和宿主免疫系统之间的相互作用介导的多因素过程。过去十几年的研究表明呼吸道病毒常常通过补充机会性细菌病原体的生长而促进继发性细菌感染。病毒感染从组织学和功能上损害呼吸道。 细胞损失、杯状细胞增生、粘液分泌改变、纤毛跳动频率降低、粘液纤毛清除功能不协调以及氧交换减少是病毒感染的特征。这些影响与不同的分子机制有关通过这些机制病毒在呼吸道中发生易感性从而促进细菌感染。 同时病毒感染可能用来驱动急性加重的另一种机制是诱导血管舒张或紧密连接开放因子这可能会增加浸润率。这也增加了过敏原与气道免疫细胞接触的机会。 呼吸道是一个复杂的器官系统分为不同的区域上呼吸道包括鼻腔、咽和喉而下呼吸道则由传导气道气管和支气管、小气道细支气管和呼吸区肺泡组成。总的来说这个巨大的表面积蕴藏着一系列不同的微生物群落其中细菌负荷最高的位于上呼吸道。 呼吸道微生物组的发现始于 2008 年的人类微生物组计划这要归功于使用 16S rRNA 基因的高通量测序的发展。从那时起各种研究证明了上呼吸道URT和下呼吸道LRT中微生物组的存在及其对肺稳态的重要性。自过去十年以来进行了大量研究来了解病毒感染对微生物组的影响。 各种 NGS 研究表明呼吸道合胞病毒Respiratory Syncytial VirusRSV和流感病毒通过直接或间接过程改变呼吸道微生物组导致生态失调。对呼吸道病毒感染的人类样本进行的研究表明从拟杆菌门到变形菌门的转变包括许多革兰氏阴性致病菌。 迄今为止URT的细菌定植被认为是原发性病毒感染后细菌侵入肺部的第一阶段。流感病毒诱导的信号例如 ATP 的释放导致生物膜中分散的细菌增加与致病表型相关。 上呼吸道病毒感染后可出现细菌性肺炎并使下呼吸道病毒感染复杂化。继发性细菌性肺炎是流感相关死亡的主要原因。 我们评估了以下假设 i呼吸道病毒通过改变上呼吸道URT的细菌群落结构来影响肺炎的病因 ii呼吸道病毒促进或抑制下呼吸道LRT的定植由 URT 中的某些细菌种类引起。 通过对文献的系统回顾发现病毒既改变了URT中的细菌群落又促进了LRT中的细菌定植。 流感和细菌性肺炎是全世界传染病发病和死亡的主要原因。多种病毒、细菌和真菌病原体吸入肺部后可引起肺炎。几乎所有这些严重肺炎病例都用抗生素治疗因为继发细菌感染会使下呼吸道病毒感染复杂化。因此即使在确定仅由病毒病因引起的肺炎的病例中病毒和细菌的细菌相互作用也可能发挥一定作用。 确定肺炎病因的挑战 即使在美国等定期进行肺炎监测的国家大约 65-85% 的住院肺炎病例也没有记录微生物病原学信息。重症患者通常不被纳入监测范围在患者临床出现时或检测之前由于怀疑肺炎时需要快速使用抗生素治疗致病途径上的微生物可能已被清除并且很少对老年人进行尸检。为了最佳地确定病因需要通过支气管肺泡灌洗直接取样但由于易于收集、道德问题和成本通常对血液、痰液和尿液进行致病因子检测。成人肺炎病例中仅 7%–13% 观察到菌血症儿童肺炎病例中观察到菌血症为 1–5%痰液可能被 URT 中的细菌污染且很难从儿童身上获取血液和尿液抗原检测需要进一步检测验证或仅限于成人并且仅针对少数病原体例如肺炎链球菌和军团菌。尽管现代分子生物学技术使得对所有存在的细菌、病毒和真菌物种进行非针对性筛查成为可能但仍然很难区分感染、定植或污染。需要继续努力开发更准确的方法来确定肺炎的病因从而最大限度地发挥治疗和预防作用。 本文主要探讨了常见的病毒性呼吸道感染以及其可能引起的继发性细菌感染。比较了上呼吸道和下呼吸道微生物组的组成差异并分析了病毒感染后细菌性肺炎发生的潜在机制。接下来着重讨论了肠道微生物组与呼吸道感染之间的相互作用以及这种相互作用如何影响宿主的健康和疾病进程。通过这些分析本文旨在为预防和干预病毒感染后的继发细菌感染提供重要的见解和警示。 01呼吸道感染常见病毒及其继发或混合细菌感染 病毒感染是一个常见的问题尤其是在年轻人和老年人中。呼吸道是微生物暴露的主要门户病毒感染可导致无症状、轻度和自限性或严重且有时致命的感染。尽管已经确定病毒特异性特性例如寿命和复制动力学会影响临床表现但人们不太清楚为什么在感染同一病毒株的人群中可能会出现不同的感染结果。新出现的证据表明肺部和胃肠道微生物组的组成存在人际差异特别是乳酸菌的成员属作为定义呼吸道病毒感染结果的关键组成部分。 ▼甲型流感病毒 (IAV) 甲流病毒变异与疫苗挑战 甲型流感病毒 (IAV) 是一种由负义片段化 RNA 病毒引起的人类和动物高度传染性上呼吸道 (URT) 疾病。它被认为是一个主要的公共卫生问题每年都会造成严重的疾病和经济负担。 注负义片段化RNA病毒是指RNA病毒的基因组由负义片段组成。在这种病毒中基因组的信息被存储在负义链上而不是通常的正义链。负义链的信息需要通过反向转录过程转化为正义链以便进行蛋白质合成。 频繁的核苷酸替换会导致甲流病毒颗粒表面的血凝素和神经氨酸酶糖蛋白发生变化也称为抗原漂移从而需要持续更新疫苗。在疫苗设计和病毒突变之间的这种进化“军备竞赛”下平均每年导致 3-500 万例重症病例和高达 291,000 ~ 646,000 人死亡。 甲型H1N1流感病毒的传播 分段甲流病毒基因组的模块化结构允许与其他不同的甲流病毒进行遗传重配抗原转移从而导致能够引起大规模流行病或大流行的新型病毒的零星出现。过去新的甲流病毒在未接触过的人群中传播曾引起过大流行导致严重的发病率和死亡率其中最引人注目的是 1918 年和 1919 年当时的西班牙流感导致全球约 20 至 5000 万人死亡。 上呼吸道合并感染 对 1918 年大流行病尸检标本的回顾性分析揭示了由上呼吸道细菌引起的继发性重复感染的流行。然而细菌合并感染在疾病预后中的作用不仅限于流行病季节性流感流行期间细菌和病毒的双重感染通常会导致住院人数、重症和死亡人数增加。 微生物组与甲流病毒感染 尽管非患病个体的微生物组相对稳定但甲流病毒感染已被证明会增加上呼吸道中存在的细菌类群的多样性。具体而言甲流病毒可导致葡萄球菌属和拟杆菌属以及嗜血杆菌属、梭杆菌属和其他类群的相对丰度发生变化。 在急性或慢性疾病期间由于局部上皮细胞的变化而导致微生物群的暂时紊乱也是感染的诱发因素。上呼吸道微生物群也可能在调节甲流病毒感染期间诱导的炎症反应中发挥有益作用。 此外肠道微生物组组成在甲流病毒感染后可正向调节 Toll 样受体 7 信号通路。不过甲流病毒复制和诱导先天免疫反应对人类或动物上呼吸道微生物组组成的影响仍有待在社区范围内进行深入阐明和分析。 人类 URT 病毒感染期间假单胞菌大量繁殖 对感染者和健康患者菌群分析结果发现在感染者队列中最常见的类群是γ变形菌而在健康患者队列中最常见的类群是放线菌。除此之外所有其他的分类单元都被归类到一个名为“其他”的附加分类单元中。在流感感染个体的所有样本中假单胞菌是最丰富的分类群。系统发育推断将该分类单元可靠地定位为假单胞菌属但无法进一步确定到物种水平。 其他数量较少的门包括拟杆菌门、厚壁菌门、放线菌门和变形菌门的一些其他科如红杆菌科和巴斯德氏菌科Gammaproteobacteria和根瘤菌目的布鲁氏菌科Alphaproteobacteria。在对个体进行时间动态分析时假单胞菌也被确认为主要的分类群。对于未感染的受试者放线菌是最主要的分类群而假单胞菌则是存在数量最少的分类群。这些结果在个体受试者的分析中也得到了验证。其他较少丰富的门包括疣微菌门和变形菌门、α变形菌门和ε变形菌门。 未感染 IAV左和感染 IAV右的人类受试者的综合分类分类 每列都是一个特定样本。该图总结了 5% 的样本中存在的分类群在类水平上的相对分类丰度参见下面的图例按每个队列中最丰富的分类群按降序排序。γ 变形菌假单胞菌橙色在感染患者中普遍存在右而放线菌在健康患者中最为丰富。 b在感染患者中观察到的 γ 变形菌目左和科右水平细分。 流感后细菌性肺炎的严重程度 流感后细菌性肺炎在季节性和大流行性流感病毒疾病相关的发病率和死亡率中发挥着重要作用。大流行预防和管理的一个重要部分是了解流感感染与继发细菌感染之间的关系。 在美国 2003-2004 年流感季节的一项全国调查中传染病专家观察到成人和儿童患者细菌并发症的发生率分别为 1.6% 和 2%我国的这个调查数据没有查到应该也差不多。 ——死亡人数 1918-1919 年流感大流行中的大多数死亡可能直接由常见上呼吸道细菌引起的继发性肺炎造成。肺组织样本表明估计的 20-6000 万人死亡中大部分是由于细菌重复感染而不是病毒的直接影响。 ——住院情况 在季节性流行期间流感细菌合并感染与住院人数增加有关。入住 ICU 的四分之一的严重甲型流感感染患者出现细菌或病毒合并感染。系统回顾和荟萃分析显示细菌合并感染的频率变化很大范围从 2% 到 65%。 最常见的共感染细菌是肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌 这两种细菌分别占 35%95% CI14-56%和 28%95% CI16-40。其他多种病原体例如肺炎嗜血杆菌或肺炎克雷伯菌引起了其余的感染。 有个研究在2010年至2018年的八个流感季节进行了一项回顾性、观察性研究。在209名流感相关肺炎入院患者中41名19.6%被确定为社区获得性细菌合并感染主要是沙门氏菌感染和金黄色葡萄球菌。这种现象在流感相关肺炎中经常观察到但迄今为止尚未发现危险因素。 细菌合并感染可能预测严重程度并且是院内死亡的独立危险因素。此外金黄色葡萄球菌和流感的混合感染经常导致致命的协同作用。 ▼呼吸道合胞病毒RSV 呼吸道合胞病毒Respiratory Syncytial VirusRSV是 1 岁以下儿童细支气管炎的最常见原因。RSV 还导致老年人和免疫功能低下的成年人发生急性下呼吸道感染。该疾病通常与同时或继发的细菌感染有关。 RSV 和细菌的共同感染 对医院内 RSV 感染患者进行的多项研究显示RSV 感染患者与下呼吸道细菌合并感染有关17.5% 至 44% 的患者 RSV 和细菌合并感染均呈阳性。 最常见的分离细菌是肺炎链球菌和流感嗜血杆菌。然而最近的研究表明 RSV 和金黄色葡萄球菌之间存在最普遍的关联尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 。与单纯 RSV 感染相比细菌合并感染与 RSV 感染通常与易感人群中更严重的疾病相关。 ▼SARS-CoV-2 SARS-CoV-2是一种单股正链RNA病毒属于β冠状病毒属。它通过飞沫传播和接触传播感染人类的呼吸道引起了全球范围内的疫情。 截至 发现3年内SARS-CoV-2 已迅速成为全球主要病原体COVID-19 大流行影响了全球超过 2 亿人并导致超过 超过400万人死亡。 因新冠入院的患者细菌合并感染的频率较低 最近一项大型多中心前瞻性队列研究表明在英国第一波大流行期间经微生物学证实的细菌感染主要是继发性感染在因 COVID-19 入院的患者中很少见低于 2.3%。这一结果与之前的几项观察性研究和荟萃分析一致这些研究和荟萃分析报告了因 COVID-19 入院的患者细菌合并感染的频率较低。 细菌合并感染在重症患者中更为常见 最近对 3338 名 COVID-19 患者进行了荟萃分析以评估细菌合并感染。3.5%的患者出现这种现象95% CI 0.4-6.7%但14.3%的患者也观察到继发细菌感染95% CI 9.6-18.9%。 一般来说出现细菌感染的 COVID-19 患者比例为 6.9%95% CI 4.3-9.5%。然而细菌合并感染在重症患者中更为常见8.1%95% CI 2.3-13.8%。 在一般住院患者中观察到细菌合并感染的频率较低可能不需要抗菌治疗。其他荟萃分析研究中也观察到类似的结果。 与单纯感染患者相比社区获得性混合感染和医院获得性重复感染的 COVID-19 患者的预后最差。 常见的共感染细菌 主要检出肺炎链球菌、肺炎支原体、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、流感嗜血杆菌尤其是危重患者。 相比之下其他研究声称重症 COVID-19 患者中存在细菌和真菌混合感染包括鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌。 所有临床数据都表明SARS-CoV-2感染者的细菌或真菌合并感染率低于流感病毒感染者。当然这也可能是由于漏报问题、抗生素的广泛使用或限制几种呼吸道病原体传播的控制措施的实施造成的。迄今为止对 COVID-19 患者合并感染的重要性及其对发病机制的影响仍知之甚少。 继发性细菌感染及其在病毒感染期间的免疫反应列表 编辑 Manna S et al., J Infect Public Health. 2020,1397-1404. 02呼吸道微生物组 吸道微生物组的多样性与健康关联 人类呼吸道的微生物群是多样且异质的与多种疾病和表型相关。 上呼吸道栖息着丰富而复杂的微生物组以健康个体的口腔共生类群为主。 相比之下健康个体的下呼吸道微生物组声带下方的生物量通常相当低其定义是通过上呼吸道微抽吸输入的竞争动态以及通过粘液纤毛活动和先天免疫功能清除的竞争动态可能存在一些有限的局部微生物复制。 因此上呼吸道微生物组的变化不仅会影响局部微生物组与宿主的相互作用还会影响下呼吸道的微生物组与宿主的相互作用。 微生物组变化与疾病状态的联系 在各种疾病状态下通过增加进入下呼吸道、清除缺陷或下呼吸道微生物生长增加维持低微生物量肺微生物组的平衡可能被破坏。 上呼吸道微生物群在晚期肺病、HIV 感染、血管炎和流感等情况下以及吸烟等暴露条件下会发生改变。 下呼吸道肺微生物组不仅在化脓性肺部疾病如囊性纤维化和肺炎中发生改变而且在通常不被认为是微生物引起的肺部疾病包括哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)和肺纤维化以及机械暴露等肺部疾病中也发生改变。 微生物组与病毒感染的关系 上呼吸道微生物组的变化与病毒感染的易感性有关特别是在流感暴露个体中并且与 RSV 感染的疾病严重程度有关。例如一项家庭传播研究发现链球菌属的丰度增加。病毒感染也可以改变细菌微生物组从而导致潜在的双向相互作用。因此人们对气道微生物组在 COVID-19 中的潜在作用的研究产生了浓厚的兴趣。 呼吸道微生物组对免疫系统的影响 呼吸道微生物群影响宿主健康的方式之一是通过局部和全身免疫系统的调节。如在 COVID-19 中的免疫反应与疾病进展和结果密切相关。 在健康方面肺部免疫张力受到通过上呼吸道微抽吸获得的生理微生物群的调节气道生态失调与炎症增加有关例如哮喘或接触香烟烟雾。 重要的是过去五年的研究表明呼吸道微生物组在调节急性肺损伤患者或有急性肺损伤风险的患者的严重程度方面发挥着作用。肺微生物组负荷和组成与急性肺损伤患者的局部和全身炎症相关并预测患有急性呼吸窘迫综合征ARDS的机械通气危重患者的临床结果。 创伤后肺微生物组的组成与 ARDS 的发生有关并且被认为可以介导吸烟对 ARDS 发生风险的影响 。因此呼吸道微生物组与多种可导致严重肺损伤的情况下的局部和全身机制相关并可能通过局部和全身机制影响结果。 成人上呼吸道的主要细菌属和微生物组种类 doi: 10.3390/biology9100318 在 COVID-19 中已观察到免疫抑制和失控的炎症并可能导致更严重的疾病而保护性免疫涉及诱导体液和细胞介导的反应。感染可诱导多种促炎细胞因子如 IL-1B、IL-6、TNF、IL1RA、CXCL10/IP10、MIP-1α 和 CCL2。几种 SARS CoV-2 蛋白能够通过延迟 I 型干扰素反应来抑制抗病毒免疫。 ▼上呼吸道微生物组 上面讲过上呼吸道和下呼吸道具有相似的微生物群落组成尽管前者在健康宿主中的微生物密度要高得多。已知有几个因素会影响气道微生物组的组成包括感染史、年龄、遗传和结构性肺疾病。 上呼吸道是一个相互连接的系统由前鼻孔、鼻腔、鼻咽、鼻窦、咽鼓管、中耳腔、口腔、口咽和喉组成每个系统都作为独特的生态位拥有自己的微生物群落。 在健康成年人中鼻腔中存在的细菌通常是与皮肤相关的细菌主要是放线菌门例如棒状杆菌属、丙酸杆菌属其次是厚壁菌门例如葡萄球菌属和变形菌门。 口咽部含有厚壁菌门、变形菌门和拟杆菌门的成员包括链球菌、奈瑟菌、嗜血杆菌和毛螺旋菌属。皮肤和口腔谱系以鼻咽为代表例如链球菌、葡萄球菌、棒状杆菌和普雷沃菌。 包括肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌在内的有限数量的病原体是 URT 的共生细菌。 ▼下呼吸道微生物组 呼吸道微生物组的分布与动态 在健康个体中LRT 中的微生物群落丰富度即细菌类群总数低于 URT 中的微生物群落丰富度即细菌类群总数。 与正常健康的肺部是无菌环境相反可以使用测序技术来识别独特且有些动态的肺部微生物组微抽吸是微生物从 URT 迁移到 LRT 的主要途径。 健康/慢性气道疾病中肺部微生物组的特征 健康肺部的主要门是拟杆菌门和厚壁菌门其中主要包括普雷沃氏菌、韦荣球菌和链球菌。患有慢性气道疾病例如囊性纤维化、慢性阻塞性肺病的个体肺部细菌数量增加并且某些物种的相对丰度存在差异。 微生物群落与呼吸道感染 由于内在或外在因素导致的气道清除受损导致可以利用这种生长机会的细菌种类的增殖。URT 的细菌定植通常被认为是侵袭性细菌感染发展的第一步包括呼吸道病毒感染后的继发性细菌感染。下面将更详细地讨论细菌丰度、物种多样性以及影响后续感染免疫反应的因素。 03共同感染/重复感染的机制 呼吸道合并感染和重复感染涉及多种机制。长期以来病毒感染对上皮屏障的影响被认为是细菌二重感染的主要原因。最近多项研究表明抗病毒免疫反应也在混合感染中发挥作用。 病毒对继发细菌感染的易感性机制 doi: 10.1016/j.jiph.2020.07.003 尽管在下文单独整理讲述但是生理学和免疫学机制是同时存在且密切相关的。 ▼上皮损伤 病毒感染可破坏上皮完整性导致紧密连接和细胞骨架功能障碍 上皮细胞在防止吸入病原体和颗粒物的入侵方面具有至关重要的作用。上皮细胞通过紧密连接组装成假复层结构为病原体创造了不可渗透的屏障。SARS-CoV-2感染后在气液界面培养的人原代上皮细胞HAE中观察到跨上皮阻力急剧下降和细胞形态改变表明上皮完整性被破坏。 使用类似的体外模型对流感和 RSV 进行了类似的观察。在动物模型中还发现病毒感染后观察到的脱屑、纤毛缺失、免疫细胞浸润和坏死之间存在相关性。 单次病毒感染后经常观察到紧密连接和细胞骨架功能障碍。RSV 和流感病毒可以通过直接或间接靶向相关蛋白质例如claudin、occludin 或ZO-1来减少紧密连接并诱导F-肌动蛋白细胞骨架重排从而导致细胞形态改变。 呼吸道病毒引起的上皮损伤是导致继发感染的原因之一 原发性流感或RSV感染会引起上皮损伤导致动物模型对金黄色葡萄球菌或肺炎链球菌的易感性更高。 病毒诱导的细胞凋亡也可能通过多种机制例如 FasL/TRAIL 途径导致上皮屏障的丧失。尽管没有经过专门研究但一些研究表明病毒诱导的细胞凋亡/坏死与对细菌重复感染的较高易感性之间存在相关性细胞碎片可改善细菌粘附和侵袭。 ▼气道功能的改变 病毒感染→粘液分泌增加和纤毛损伤→破坏粘液纤毛清除机制 病毒引起的气道功能改变也是呼吸道合并感染的原因。上皮可以通过粘液纤毛清除来阻止感染粘液纤毛清除重新组合了两种基本机制 i产生粘液一种多成分分泌物捕获吸入的病原体ii恢复气道的活动纤毛的存在连续敲打 粘液纤毛清除机制受损→气道阻塞→为继发性感染创造条件 众所周知上皮细胞在感染后会产生粘液以减少流感、RSV 或 SARS-CoV-2 的感染。然而这会导致气道阻塞反映出在患者中观察到的肺活量下降。RSV 和流感病毒在感染后也会增加粘液相关蛋白例如粘蛋白。 呼吸道病毒主要针对纤毛上皮细胞诱导细胞死亡从而导致纤毛损失。到目前为止还没有研究明确关注合并感染期间粘液纤毛清除的分子机制。 ▼病毒感染后细菌粘附增强 RSV 和流感病毒增强病原体粘附 原发性病毒感染也会增加呼吸道中的细菌粘附。RSV 感染通过 G 糖蛋白与细菌成分的直接结合增加肺炎链球菌对上皮细胞的粘附和毒力。 G 糖蛋白在感染后锚定在细胞膜上并充当细菌受体。转录组学研究表明RSV 增加了 RSV 感染细胞表面的粘附分子例如 CD47导致肺炎链球菌粘附增加。 病毒蛋白质作为细菌受体 流感病毒还通过增加受感染细胞膜上的纤维蛋白原、糖蛋白修饰和唾液酸来增强各种模型中金黄色葡萄球菌或肺炎链球菌的粘附。血小板激活因子受体 (PAF-R)也与细菌相互作用促进重复感染。流感糖蛋白血凝素和神经氨酸酶也促进细菌粘附充当或暴露细菌受体。 冠状病毒与特定细菌的重复感染 另一种人类冠状病毒 (HCoV-NL63) 增强了LLC-MK2 和 HAE 细胞中肺炎链球菌的重复感染但对金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌或铜绿假单胞菌等其他细菌没有增强作用。 ▼病毒感染后修复延迟 重复感染加剧病理严重程度 流感和肺炎链球菌或金黄色葡萄球菌重复感染的各种小鼠模型在流感感染后 7 天接种细菌时表现出致命的协同作用这表明重复感染在病毒感染后期的修复过程中增强了病理严重程度。 病毒感染干扰细胞修复机制 观察到修复细胞反应受损尤其是巨噬细胞和上皮细胞的修复细胞反应受损细胞再生减少和稳态信号通路改变。RSV 可以通过增加 MMP 或生长因子的产生来干扰修复机制从而导致纤维化加剧。 细胞修复延迟与重复感染相关 流感病毒和肺炎链球菌重复感染小鼠模型的转录谱显示48hpi 上皮细胞增殖和上皮修复增加。此外观察到基因上调与疾病严重程度之间存在相关性表明修复机制的改变与重复感染有关。最近证明流感病毒诱导的 I 型和 III 型干扰素可延迟修复阶段的上皮细胞增殖。注意到 p53 激活和细胞周期改变导致细胞凋亡增加导致细胞分化和生长抑制以及上皮修复延迟。 感染流感的Ifnlr1−/−小鼠在重复感染肺炎链球菌后具有更好的存活率这表明病毒感染后诱导的IFN-λ延迟了上皮修复并导致继发性细菌感染。 共同感染的生理机制总结如下 与细菌重复感染相关的生理机制的示意图 原发性病毒感染对上皮完整性和功能的影响上皮损伤、修复延迟有助于为继发性细菌感染的建立创造有利的环境。 04呼吸道病毒感染期间微生物群 ▼上呼吸道 呼吸道病毒通过URT进入人体其一种可能的机制是改变上呼吸道的微生物组成促进病原体的生长并促进大量细菌随后进入。 横断面研究 病毒感染与细菌定植的互作 考虑到病毒对增强细菌对上皮细胞粘附的影响对人类受试者以及动物模型的多项研究表明病毒感染与潜在致病菌的定植增加有关这也许并不奇怪。 使用 qPCR 检测感染或未感染甲型流感的成年患者中的特定细菌进行的比较分析显示感染患者中分别有 12%、24% 和 32% 存在金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌和流感嗜血杆菌而 5% 的感染患者中共同存在金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌和流感嗜血杆菌。在体外实验模型中病毒感染会增加 URT 中各种细菌的定植率 包括肺炎链球菌和流感嗜血杆菌。 较高的致病菌负荷与呼吸道病毒合并感染和继发性细菌感染风险增加相关 在儿童中流感与鼻咽部肺炎链球菌滴度增加 15 倍相关。动物模型也同样证实病毒感染尤其是流感会增加 URT 中的细菌定植率从而增加继发细菌感染的风险。 在调整年龄和性别后较高的肺炎球菌定植密度与呼吸道病毒合并感染和侵袭性肺炎球菌肺炎有关。 另一项比较患有和不患有肺炎的鼻咽细菌的病例对照研究也发现鼻咽部肺炎链球菌而非流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌的负荷与病毒合并感染和肺炎之间存在关联。 病毒感染可能会增强细菌的传播 在一项对小鼠定植肺炎链球菌并在 3 天后感染甲型流感病毒的研究中只有当所有小鼠都感染流感并被流感中和抗体阻断时才会发生肺炎链球菌传播。然而虽然特定细菌可能在病毒感染期间获得竞争优势但这并不普遍适用于所有细菌类群。最近一项针对患有和未患有呼吸道病毒感染的受试者的研究表明与未感染的对照组相比病毒感染受试者鼻咽样本中的总体细菌丰度较低。 急性病毒感染和细菌定植之间的关系是双向的 细菌携带或其配体可以增加或降低病毒感染率从而对随后的宿主对病毒感染的免疫反应产生积极或消极的影响。接触肺炎链球菌可以增强呼吸道中的病毒复制。 与没有定植的患者相比携带肺炎链球菌的患者更有可能经历随后的急性呼吸道疾病发作。此外气道中存在的细菌可以调节宿主针对病毒感染的反应。 鼻咽共生体的存在可以保护小鼠免受 RSV 诱导的气道高反应性 感染 RSV 的小鼠在接受抗生素介导的鼻咽部草绿色链球菌清除后表现出炎症淋巴细胞数量和气道高反应性增加以及调节性 T 细胞数量和转化生长因子-β 产生的减少。 特定细菌定植对免疫应答的影响 其他研究表明金黄色葡萄球菌在上呼吸道的定植可通过将 2 型 CC 趋化因子受体分化簇 (CD)11b 单核细胞子集募集到肺部并诱导 M2从而显著降低小鼠中流感引起的急性肺损伤和死亡率。 病毒感染对微生物组多样性的影响不一致受多因素影响 随着新一代 16S rRNA 测序的出现基于微生物组的研究试图辨别病毒感染期间每个解剖生态位的细菌群落的整体变化模式例如多样性的变化。多样性可以使用各种指数来评估例如微生物组的独特物种总数即丰富度或考虑群落成员的丰富度和相对丰度均匀度的其他衡量标准例如香农指数。 当将病毒感染受试者与健康对照进行比较时微生物组分析的结果并未显示出一致的多样性变化。考虑到采样对象的可变性、病毒感染的类型和严重程度、样本收集的类型和时间以及分析方法的差异。 多样性与严重程度有关 法国对因流感入院的儿童进行的一项研究表明随着流感严重程度的增加鼻咽微生物群的多样性也随之增加。 多样性与病毒感染的类型有关 我国最近一项针对 H7N9 禽流感患者的研究表明与健康对照相比H7N9 感染患者的口咽微生物组多样性显着增加特别是继发细菌性肺炎的 H7N9 患者。 相反法国的一项鼻咽样本研究和韩国的一项急性呼吸道病毒感染患者口咽样本研究均显示与健康对照相比病毒感染期间多样性指数有所下降 。 这两项研究的受试者范围从婴儿到 80 岁以上的成人限制了有关年龄相关影响的结论。在接受鼻病毒实验性自我接种的健康志愿者中进行的纵向研究也未能证明 URT 微生物组多样性的显着变化而对健康成年人注射 LAIV 疫苗导致病毒攻击后多样性指标的增加。 因此与多样性降低被认为对宿主有害的其他疾病不同病毒感染对多样性本身的影响是可变的目前不被认为是并发症风险的良好指标包括继发性细菌性肺炎。 微生物组测序研究还使研究人员能够同时识别多个细菌类群之间的丰度变化而不仅仅是可以单独培养的细菌类群。这使得研究人员能够确定哪些细菌群在病毒感染期间一致变化哪些细菌群相互竞争。 各种病毒感染中微生物群的变化 法国最近一项基于宏基因组学的研究报告称与健康对照相比确诊呼吸道病毒感染受试者的鼻咽样本中金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌和肺炎克雷伯菌富集。 对感染和未感染 2009 年甲型 H1N1 流感大流行病毒感染的肺炎患者的口咽微生物组进行的检查显示厚壁菌门包括葡萄球菌和链球菌和变形菌主要是杏仁假单胞菌、荧光假单胞菌、假单胞菌UK4、鲍曼不动杆菌——在流感患者中显着富集。 另一项针对 2009 年大流行 H1N1 流感感染患者的研究表明尽管未包括正常对照但携带大流行 H1N1 流感的患者上呼吸道鼻和鼻咽样本的主要门是放线菌门、厚壁菌门和变形菌门然而作者认为流感与变形菌的扩张有关而变形菌在健康宿主中的数量通常较少。这些发现得到了另一组的支持他们发现莫拉氏菌和肠杆菌属被归类为变形菌门是从大流行性 H1N1 流感患者的鼻咽样本中获得的最具代表性的细菌。然而这些研究表明受试者之间存在相当大的变异性强调需要进行纵向研究来破译病毒感染后的变化。 特定病毒是否始终与某些细菌类群的富集相关 在澳大利亚原住民和非原住民儿童的鼻咽腔中检测到 HRV 与肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉氏菌携带之间以及腺病毒与卡他莫拉氏菌之间存在正相关性。另一项研究通过 PCR 检测 20 种呼吸道病毒的存在以及儿童鼻咽部细菌携带的流行率发现金黄色葡萄球菌定植与流感病毒之间存在很强的正相关性。 此外肺炎链球菌定植与 HRV 和肠道病毒的存在呈正相关。流感嗜血杆菌与 HRV 和 RSV 呈正相关卡他莫拉氏菌定植与冠状病毒和腺病毒呈正相关。 一项针对患有急性 RSV 或 HRV 呼吸道感染的婴儿进行的基于 16s rRNA 测序的研究报告称患有 RSV 的婴儿的葡萄球菌丰度显著更高。 上呼吸道细菌群特征与宿主年龄相关 通过不依赖于培养物的焦磷酸测序对 57 名健康无症状个体和 59 名流感病毒、副流感、hRV、RSV、冠状病毒、腺病毒或偏肺病毒患者的 URT 细菌含量进行分析揭示了六种不同的细菌谱即链球菌普雷沃氏菌韦荣氏菌、链球菌嗜血杆菌奈瑟菌、链球菌、莫拉氏菌、嗜血杆菌和克雷伯氏菌。然而这些特征与病毒类型无关但与受试者的年龄有关。 病毒后细菌性肺炎成因复杂需深入研究 鉴于许多人类研究本质上是横断面的目前尚不清楚病毒后细菌性肺炎是否可能是病毒感染增强细菌定植或获得、定植细菌影响宿主对呼吸道病毒感染的易感性或两者结合的结果。另一个复杂的因素特别是在病毒感染期间检查微生物组的横断面研究中是组群控制不佳而且考虑到可能影响呼吸道微生物组的变量数量例如年龄、性别、口腔卫生和挖鼻孔习惯、基于医疗保健的就业状况、吸烟状况、药物使用、接触幼儿等。 病毒感染的潜在类型、感染发生后的采样时间点、感染的严重程度以及伴随的抗菌药物使用情况其他混杂因素。这可能是病毒感染患者微生物组研究中高度可变且有时不一致的观察结果的基础。 纵向研究 由于感染前采样困难很少有临床研究比较患有急性病毒感染的其他健康个体感染前和感染后微生物组的基线。然而现有的研究相对较少可以深入了解细菌定植模式随时间的动态和稳定性以及急性病毒感染引起的扰动是否以及如何改变这些模式。 在健康儿童中鼻咽部微生物群的主要门是变形菌门、厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门和梭杆菌门其中莫拉菌、嗜血杆菌、链球菌、黄杆菌、多洛西颗粒菌、棒状杆菌和奈瑟菌为主要属。 不同季节鼻咽微生物组变化的研究不一致 不同季节观察到鼻咽微生物组多样性的变化秋季冬季以变形菌门和梭杆菌门为主春季以拟杆菌门和厚壁菌门为主这些差异与最近的抗生素和病毒合并感染无关。 然而对 40 名哮喘儿童和青少年相隔 5.5-6.5 个月收集的两次鼻咽冲洗液进行的另一项分析表明不同季节鼻咽微生物组多样性没有显着差异尽管嗜血杆菌、莫拉氏菌、葡萄球菌和棒状杆菌的平均相对丰度在夏季和秋季样本之间以及不同年龄组之间存在显著差异。 此外在 87.5% 的患者中患者微生物丰度在不同时间点之间存在显着差异。对冬季和夏季无症状医疗人员的细菌和病毒载量的频率和季节变化进行的一项调查显示在冬季接受测试的 100 名受试者中34 人被至少一种细菌定植11 人至少检测出一种病毒的阳性。 最常检测到的病原体是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、卡他莫拉菌和冠状病毒。相比之下在夏季测试的 100 名受试者中37 名受试者至少携带一种细菌主要是 MRSA 和肺炎克雷伯菌四名受试者检测出一种病毒呈阳性。 另一项对 31 个有小孩的家庭进行纵向鼻拭子采样的研究表明鼻病毒感染与社区中肺炎链球菌感染的增加以及肺炎链球菌在家庭内传播的增加有关。 其他小组研究了将 hRV 实验接种到 URT鼻孔中的效果。这些研究报告称随着时间的推移鼻咽样本或咽拭子的总读数或主要门例如放线菌门、厚壁菌门和变形菌门没有显著变化。在口咽部鼻病毒感染与副流感嗜血杆菌、微黄奈瑟菌Neisseria subflava相对丰度短暂增加的强烈趋势以及金黄色葡萄球菌相对丰度增加的微弱趋势相关。到 60 天时这些细菌的丰度已恢复到基线。 鼻咽取样显示完全相反的结果在 hRV 感染后的受试者中嗜血杆菌和奈瑟菌属的相对丰度降低但正常鼻共生丙酸杆菌增加。没有观察到葡萄球菌的差异。然而这两项研究的受试者数量都很少限制了检测随时间变化的能力。 ▼下呼吸道 与 URT 微生物组的研究相比由于难以从肺部获取未污染的样本因此对病毒感染后的 LRT 微生物组的研究相对较少。方便的样本例如痰液会受到口腔污染但支气管镜样本是侵入性的并且定期获取的成本很高。 此外目前还不清楚除了慢性肺病例如慢性阻塞性肺病患者之外肺部微生物负荷是否足以对免疫反应和病毒感染期间继发细菌感染的风险产生强大影响。 来自流感感染小鼠模型的数据似乎表明流感感染对肺部微生物组的细菌计数、多样性和组成仅产生适度的影响。 在 hRV 感染后患有慢性阻塞性肺疾病(COPD) 的受试者中但在健康个体中则不然基线时细菌负荷和细菌生长有所增加特别是流感嗜血杆菌。 研究人员观察到细菌的生长似乎源于现有的群落。将肺炎链球菌鼻内接种到预先感染流感病毒的小鼠体内首先在鼻子中定植几天后气管和肺部出现化脓性炎症。然而在未感染的动物中没有观察到这种效应。这表明在流感病毒感染者中肺炎球菌感染可能从URT顺序发展到LRT。因此一些流感感染者的肺部微生物组可能会因 URT 微生物群落的变化而发生变化。 微生物间相互作用 细菌中已经进化出竞争优势的机制使它们能够在原本恶劣的宿主环境中生存。然而种间竞争也可以通过捕获稀缺资源例如铁的能力或有针对性地杀死其他细菌例如细菌素来维持微生物群落的稳态从而防止一种微生物主宰群落。 因此急性病毒感染引起的免疫反应、病毒引起的宿主上皮表面的变化或病毒本身可能导致消除负责控制病原体的宿主共生体。例如鼻孔中表皮葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的丰度与金黄色葡萄球菌携带呈负相关。 了解这些相互作用可能会为旨在减少流感流行或大流行期间致病菌定植的治疗干预措施创造新途径。 一组已被检查其在抑制金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌鼻腔携带中的作用的共生菌是棒状杆菌属。日本的一项早期研究报告了将棒状杆菌菌株引入金黄色葡萄球菌持续携带者的健康成年医院工作人员的鼻孔中的效果并成功根除 71% 的受试者该机制似乎不依赖于细菌素。 相比之下表皮葡萄球菌植入没有效果。所使用的表皮葡萄球菌菌株是否表达丝氨酸蛋白酶Esp其抑制金黄色葡萄球菌生物膜形成和鼻定植尚不清楚。 另一个小组的后续研究报告称假白喉念珠菌抑制金黄色葡萄球菌生长而Corynebacterium accolens和金黄色葡萄球菌似乎相互支持彼此的生长。相反其他研究人员观察到棒状杆菌属。 在未鼻腔定植肺炎球菌的儿童中富集并证明C. accolens通过表达脂肪酶来抑制体外肺炎链球菌生长该脂肪酶从皮肤表面三酰甘油释放游离脂肪酸从而抑制肺炎球菌生长。 因此对共生体之间种间竞争的鉴定和机制了解可能会带来新的见解即病毒感染如何为致病生物赋予竞争优势以及如何利用共生体采用的自然策略来恢复宿主微生物生态位的稳态。 有趣的是最近的一项临床前研究使用RSV和肺炎链球菌双重感染的鼠模型通过假白喉梭菌菌株进行鼻引发以增强宿主对病毒感染的防御从而增强对继发细菌攻击的清除并减少肺损伤。 感染病毒后的继发感染 感染病毒对细菌的直接影响可能促进病原体转变。宏基因组分析表明与未感染患者中的相同细菌相比pH1N1 相关的气道微生物群富含与细胞运动、转录调节、代谢和趋化反应相关的基因。这些数据表明流感感染会扰乱呼吸道微生物组导致产生包括免疫调节分子在内的次级代谢产物。病毒还会损害细菌生物膜的形成并破坏现有的生物膜。流感已被证明会通过下调与定植状态相关的基因表达和上调细菌素来影响肺炎链球菌转录组。因此病毒对细菌转录模式的直接影响可能是定植细菌获得侵入潜力的一种机制从而导致细菌重复感染。 05肠道微生物组和呼吸道感染 在人体的生态位中肠道微生物群落是研究最深入的迄今为止已发表超过 20,000 篇论文。虽然病毒组和真菌组也在分析中但大部分文献都集中在微生物组的细菌成分上因此我们对肠道微生物组与宿主免疫和慢性疾病发病机制之间关系的大部分理解来自主要来自细菌群落的研究。 这里主要介绍肠道微生物组如何维持健康的宿主免疫环境的几个重要方面。 肠道微生物代谢产物与免疫 首先肠道共生体产生的细菌代谢产物有助于维持完整的上皮完整性、调节性 T 细胞发育和相对抗炎的免疫状态。 特别是短链脂肪酸SCFA例如乙酸盐、丙酸盐和丁酸盐是大肠细菌发酵膳食纤维和碳水化合物的产物。短链脂肪酸可以 是肠上皮细胞的主要能量来源促进初始CD4T细胞发育为调节性 T 细胞诱导肠粘膜中的“耐受性”树突状细胞限制自身免疫性 同时微生物代谢物对于促进肠道针对病原体的免疫反应至关重要包括诱导 IL-18和防御素的分泌。因此微生物组代谢产物对于粘膜屏障完整性和免疫稳态的适当调节至关重要。 此外细菌群落的特定成员可以促进免疫系统的正常成熟和发育。虽然这仍然是一个正在深入研究的领域但一个值得注意的例子是发现分段丝状细菌是肠粘膜 IgA 产生 和 Th17 细胞诱导的关键促进剂。 肠道微生物失衡与慢性疾病 菌群失调或微生物群组成的不平衡与多种慢病有关其中许多疾病以慢性炎症或代谢异常为特征包括炎症性肠病、心血管疾病、糖尿病等。因此培养平衡的肠道微生物群多样性和组成对于促进健康和免疫稳态至关重要。 肠道微环境影响微生物动态变化 在健康期间微生物群的组成受到每个解剖生态位特有的许多选择压力的控制包括温度、营养可用性、pH、氧张力和局部免疫环境。由疾病、抗生素使用或饮食变化例如饥饿引起的肠道微环境的短期扰动可以改变肠道微生物群并随后导致免疫反应的短暂改变。 因此研究流感和其他呼吸道病毒是否改变胃肠道微生物组可能对病毒介导的抗菌免疫反应抑制具有机制意义。 ▼肺部防御病毒性呼吸道感染对肠道菌群影响 肠道微生物群在免疫方面的这种有益作用不仅限于肠道区室还延伸到全身区室和远处器官例如肺部。 缺乏微生物群即无菌或口服抗生素广谱或靶向抗生素如新霉素、甲硝唑或万古霉素治疗的小鼠对全身和呼吸道感染的反应受损。 在由例如甲型流感病毒(IAV)和呼吸道合胞病毒(RSV)引起的病毒性呼吸道感染的情况下抗生素治疗对肠道微生物群生态的严重扰乱削弱了宿主的先天防御和适应性防御。 肠道微生物群对肺部产生I型干扰素的影响 众所周知这些干扰素可控制病毒感染包括SARS-CoV-2COVID-19 的病原体。在这种情况下脱氨基酪氨酸源自类黄酮和氨基酸代谢和短链脂肪酸等微生物代谢产物至关重要。 例如研究表明由专性梭状芽孢杆菌Clostridium orbiscindens、对甲硝唑和万古霉素敏感能够消化植物中黄酮类化合物产生的脱氨基酪氨酸可以扩散到血液中到达肺部并启动先天免疫系统帮助身体抵抗流感病毒的感染。 脱氨基酪氨酸促进肺部 IFN 刺激基因的合成而肺吞噬细胞在此机制中至关重要。在这种情况下脱氨基酪氨酸通过 IFN-α/β 受体和信号转导器和转录激活剂增强 I 型 IFN 信号传导。例如研究表明乙酸盐可以扩散到血液中并激活基质细胞表达的GPR43。这种激活途径改善了 I 型干扰素反应并增加了干扰素刺激的基因表达。GPR43 促进 I 型 IFN 介导的流感感染保护作用的机制需要阐明。 除了微生物代谢物外源自完整肠道微生物群的微生物膜成分包括TLR配体也在宿主防御病毒性呼吸道感染中发挥着关键作用。 事实上局部和远端接种 Poly (I:C)TLR3 激动剂或肽聚糖TLR2 激动剂可以挽救抗生素治疗小鼠的免疫损伤。 值得注意的是除了肠道微生物群发出的这些远端信号外来自上呼吸道的局部微生物也调节下呼吸道免疫力并在肺部防御病毒感染方面发挥作用。这些机制在很多研究中得到证实。 ↑抗生素改变肠道菌群可能增加严重程度 肠道微生物群不仅影响先天免疫反应还可以增强 CD8 T 细胞效应器功能这一过程也参与病毒流感清除。如上所述用抗生素改变肠道微生物群会增加病毒性呼吸道感染例如流感的严重程度。 ↓高纤维饮食刺激肠道菌群可能减轻严重程度 用高纤维饮食刺激微生物组会产生相反的效果。就流感而言高纤维可发酵菊粉饮食通过两种不同的途径提供保护。膳食纤维的发酵导致骨髓造血功能改变导致 IAV 感染小鼠肺中替代激活的巨噬细胞积聚。这些巨噬细胞产生较少的趋化因子CXC 基序配体 1从而减少早期中性粒细胞浸润到气道中。 该途径极大地减少了过度的肺部炎症和损伤。该饮食还促进CD8T细胞代谢增强CD8T细胞的效应功能有效增强病毒清除。 保护作用需要 GPR41也称为游离脂肪酸受体 3口服 SCFA丁酸盐足以提供保护。在 RSV 感染期间也观察到了类似的保护作用。高纤维可发酵果胶饮食通过调节肺上皮细胞中的 I 型干扰素反应和增加肺部干扰素刺激基因的表达来防止 RSV 感染。保护作用需要 GPR43口服乙酸盐足以提供保护。 肠道微生物群在病毒性呼吸道感染中的作用 Sencio V, et al. 2021,14:296-304. 健康肠道微生物群释放的因子可以帮助肺部抵御病毒性呼吸道感染。相反抗生素治疗会扰乱肠道内的生态平衡并改变肺部的防御能力。衰老和合并症也与肠道微生物群功能的改变和呼吸道感染的易感性增加有关。 在肺部发挥抗病毒作用的肠道共生细菌的性质仍然难以捉摸。如上所述厌氧梭菌成员脱氨基酪氨酸和产短链脂肪酸菌对于肺部先天免疫系统的启动非常重要。最近一项基于易感动物和耐药动物比较的研究表明双歧杆菌属假长双歧杆菌和动物双歧杆菌的定植与流感感染小鼠的生存密切相关。很可能在不久的将来其他共生成员将被识别出来并将作为新的生物标志物来预测严重病毒性呼吸道感染患者的严重程度和死亡率。 因此在稳定状态下肠道微生物群中的常驻细菌可以自然地远程支持肺部对抗病毒性呼吸道感染。 ▼急性呼吸道病毒感染对肠道菌群的影响 研究表明除了饮食模式呼吸道病毒感染及其他压力因素也会影响肠道微生物群的组成。流感和RSV肺部感染的动物模型显示即使肠道中没有检测到呼吸道病毒肠道微生物组也会受到感染的显著影响。 流感病毒和肠道菌群 流感感染可导致轻度至重度肺炎、急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)临床上定义为急性呼吸衰竭和多器官功能障碍。尽管肠道内明显没有病毒但一些患者仍然出现类似胃肠炎的症状如腹痛、恶心、呕吐、腹泻。这表明肺-肠轴在流感感染期间可能很重要。 根据可操作分类单位数量评估细菌负荷和 α 多样性并未受到甲流病毒感染的强烈影响。在门水平上观察到的变化很少。 H1N1 亚型 IAV 感染导致拟杆菌门/厚壁菌门比率下降。 H3N2 和 H1N1 亚型感染期间还观察到疣微菌主要由阿克曼氏菌属组成增加。这些细菌会降解肠道粘液层瘤胃球菌也是如此这可能与感染期间粘液增加有关其数量在 IAV 感染期间也会增加。IAV 感染后还观察到放线菌减少主要是由于双歧杆菌科属减少。 简而言之大多数研究发现γ变形菌潜在致病性大肠杆菌增加少数情况下发现芽孢杆菌类减少。微生物群分析还强调了厚壁菌门内部的变化。综上所述感染过程中下列菌群数量相对较多 ClostridialesRuminococcaceaeMogibacteriaceceaCoprococusRoseburiaDefluvittaleaDoreaRuminococcusGemmiger 总体而言来自流感小鼠模型的数据表明感染促进了潜在有害细菌种类的出现例如γ变形菌门和粘液降解细菌的成员。相反感染似乎会抑制促进健康的细菌如乳酸杆菌、双歧杆菌和分段丝状细菌的生长。 此外小鼠体内 IAV 感染与分节丝状细菌梭菌科比例下降有关。这种细菌与肠上皮细胞密切相互作用对于宿主抵抗啮齿类柠檬酸杆菌等肠道病原体具有重要作用。 流感感染→SFB及乳杆菌减少→肠道损伤 在流感感染的小鼠模型中研究人员发现虽然肠道内的细菌总数没有减少但分段丝状菌SFB和乳杆菌/乳球菌的数量减少同时肠杆菌科细菌增加。有趣的是虽然 SFB 之前已被证明可以诱导 Th17 细胞 但感染流感的小鼠小肠和结肠中的 IL-17A 水平和 Th17 细胞数量增加这似乎导致肠道损伤。 在这项研究中流感感染前的抗生素治疗减轻了肠道损伤的程度但没有改善肺部损伤这表明肠道菌群失调导致局部炎症而不是全身炎症。 活病毒感染→变形菌增加→结肠炎易感性增加 注射减毒流感活疫苗LAIV表明这些变化需要活病毒感染。变形菌的增加似乎是由 I 型干扰素 (IFN) 介导的它不仅耗尽了厌氧菌而且还增加了继发性沙门氏菌结肠炎的易感性。然而热量限制也会导致变形菌门的相对丰度增加以及拟杆菌门与厚壁菌门的比例增加这增加了流感期间口服摄入量减少可能导致微生物组变化的可能性。 全身炎症信号介导肠道微生物变化 还表明流感感染通过招募到肠道的肺源性 T 细胞产生的 II 型干扰素来改变肠道微生物群组成。因此肠道微生物组的变化似乎不是由直接病毒效应引起的而是由从肺部传播并触发肠道局部炎症反应的全身炎症信号引起的。 肠道微生物群可以调节肺部免疫活性 doi: 10.3390/biology9100318 肠道微生物群可以调节肺部免疫活性的双向假设脂多糖 (LPS) 能够与肠粘膜上存在的TLR结合从而激活树突状细胞从而有利于各种 T 细胞的激活T-reg、T-h17、Th-1、CD4随后获得角受体CCR6、CCR9、CCR4、a4b7并通过循环淋巴流迁移至肺部CCR4/6Treg、CCR4/6Th17、CCR4/6Th1、CCR4/6CD4 。它还激活IL-18、INF-y、TNF-a、TGF-b、IL-4、IL-1这些细胞将进入循环INF-y、TNF-a、IL-6。 核因子 kappa-轻链增强子 (NFkB) 激活 IL-6、IL-10 以及 IgA 和 IgG 浆细胞 B 细胞的产生以及 IgG 向肺部的迁移。在肺部CCL17、CCL20 增加并且存在 CCR4/6、CD4、CCR4/6 和 Th17。 细菌代谢物例如短链脂肪酸通过血流迁移至肺部导致模式识别受体PRR下调从而减少炎症细胞因子IL-1、IL-12、IL-18)、肿瘤坏死因子 α (TNF-α)、干扰素γ (IFNγ) 和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 (GM-CSF)。 反过来在疾病发生时肺部会将炎症介质和淋巴细胞输送到肠道。 除了不变自然杀伤 T 细胞的配体之外粘膜相关不变 T (MAIT) 细胞的配体合成也可能在病毒呼吸道感染期间发生改变。事实上细菌共生体包括属于拟杆菌门和变形菌门的物种以及病原菌可以产生维生素 B2 和维生素 B9 代谢物已知这些代谢物可作为 MAIT 细胞的激动剂或拮抗剂。 关于 MAIT 细胞在粘膜免疫中的关键作用在病毒呼吸道感染期间改变 MAIT 细胞配体的合成可能对疾病结果产生重要影响这一假设需要进行研究。 呼吸道合胞病毒和肠道菌群 在小鼠模型中RSV 导致感染后第 7 天肠道微生物群多样性但不是丰度和 α 多样性发生显着改变拟杆菌门增加厚壁菌门减少。 拟杆菌门的增加主要是由于拟杆菌科和S24-7科的增加而厚壁菌门丰度的减少与毛螺菌科和乳杆菌科的减弱有关。RSV 感染对肠道微生物群代谢活动的影响很少被讨论。在一项研究中RSV 感染主要增加脂质代谢包括鞘脂、多不饱和脂肪酸和 SCFA 戊酸酯。 冠状病毒和肠道微生物群 一项研究通过 RNA 鸟枪法宏基因组学测序揭示在患有高感染率的 COVID-19 患者的粪便样本中存在机会性细菌病原体。 相比之下粪便样本中 SCFA 和色氨酸生产者含量丰富具有低至无 SARS-CoV-2 感染性的特征。有趣的是具有高 SARS-CoV-2 感染性的粪便具有更高的微生物组功能用于核苷酸从头生物合成、氨基酸生物合成和糖酵解。 值得注意的是在 COVID-19 患者中还描述了机会性真菌病原体曲霉属和念珠菌属的过度生长。有趣的是流感 (H1N1) 和 SARS-CoV-2 患者之间的相似点和差异。核心肠道微生物特征和相关代谢物的发现可以作为潜在的诊断标志物。 ▼病毒性呼吸道感染期间肠道菌群变化的机制 急性病毒性呼吸道感染期间肠道微生物群发生变化的原因有多种这些可能包括炎症细胞因子的释放和食物摄入量的减少。 感染病毒→食欲不振→肠道菌群紊乱 在小鼠中感染 IAV 或 RSV 会导致体重大幅减轻减轻幅度为初始体重的 10% 至 20%并在感染后 5-7 天达到峰值。这种体重减轻主要是由于食欲不振。 众所周知食物和卡路里摄入量的减少会扰乱肠道微生物群。配对喂养实验的结果清楚地表明食物摄入量的迅速下降模拟了感染期间观察到的肠道微生物群的变化即疣微菌门、α变形菌纲和副杆菌属的丰度增加而毛螺菌科、瘤胃球菌属和乳杆菌属的丰度减少尽管也观察到差异梭菌目。 纤维摄入量减少影响结肠上皮细胞代谢 纤维摄入量的减少一致配对喂养的小鼠 SCFA 浓度较低。其中丁酸盐为结肠上皮细胞提供能量促进上皮氧消耗从而导致肠腔缺氧。由于食物纤维摄入量减少而导致短链脂肪酸的下降可能会改变上皮细胞的代谢。 炎症细胞因子对肠道菌群的影响 病毒感染期间食欲不振的主要原因之一是炎症细胞因子的过量产生包括肿瘤坏死因子α。 RSV 感染期间这种细胞因子的中和减少了体重减轻并部分减弱了肠道微生物群的扰动。同样在 RSV 感染期间消耗产生细胞因子的 CD8 T 细胞可减少食欲不振并逆转肠道微生物群的变化。 I 型和 II 型干扰素是宿主抗病毒反应的重要组成部分——尤其是在流感期间。这些细胞因子强烈扰乱肠道微生物群。相对于野生型小鼠I 型 IFN 受体缺陷的小鼠表现出变形菌埃希氏菌属繁殖减少相反分节丝状细菌的比例升高。 同样IAV 感染期间 IFN-γ 的消耗恢复了分段丝状细菌在 IFN-γ 活性小鼠中减少、乳杆菌属减少和肠杆菌科增强型。因此炎症细胞因子和食欲不振可能会导致病毒性呼吸道感染期间肠道菌群失调至少在小鼠系统中是这样。 氧气梯度变化对肠道菌群的影响 其他机制也可能受到牵连。肠道炎症例如由于浸润的 CD4 T 细胞或全身性 IFN 释放而引起已知会改变上皮细胞的代谢从而导致一组新的营养物质的积累而居住在肠腔中的微生物则需要这些营养物质竞争。随着氧气可用性的增加这种现象似乎可以解释从专性厌氧菌到兼性厌氧菌例如变形菌肠杆菌科的转变。 缺氧是呼吸道病毒感染急性期的主要临床症状包括 COVID-19 患者。它还与慢性肠道损伤有关。关于氧气在肠道稳态中的作用包括微生物群的组成和功能由于 SCFA 的可用性而造成的氧气梯度破坏可能在呼吸道病毒感染期间肠道菌群失调和胃肠道疾病中发挥作用。呼吸道病毒感染期间肠道上皮免疫功能缺陷抗菌肽产生减少也可能参与生态失调。 病毒性呼吸道感染期间的“肠肺轴” Sencio V, et al. 2021,14:296-304. 总的来说病毒性呼吸道感染例如流感会改变肺部免疫和基质上皮细胞的功能从而导致继发性细菌感染。与此同时全身炎症细胞因子、食欲不振纤维减少、氧水平变化和上皮代谢改变会破坏肠道微生物群的组成和功能。 这些改变会导致肠道炎症、上皮屏障破坏和抗菌肽 (AMP) 产生减少。然后发生继发性肠道感染。上皮渗漏可能会增强细菌易位并引发全身炎症和器官功能障碍。病毒性呼吸道感染引起的菌群失调还会导致微生物相关分子模式的产生减少包括 Toll 样受体 (TLR) 和核苷酸寡聚结构域 (NOD) 样激动剂以及短链脂肪酸等微生物代谢产物从而降低抗菌肺部免疫力。因此呼吸道病毒感染通过改变肠道稳态导致细菌重复感染。 肺和肠道的相互联系在 SARS-CoV-2 感染期间可能特别相关。 消化道可能是病毒复制和活动的场所 与 IAV 和 RSV 的情况相反在冠状病毒感染包括 SARS-CoV-2 感染期间在肠道中检测到病毒 RNA。大约一半的 COVID-19 患者的粪便中含有 SARS-CoV-2 RNA即使呼吸道中不再发现它。 重要的是在 COVID-19 患者的粪便样本中检测到传染性病毒表明消化道可能是病毒复制和活动的场所。 同样最近几项使用人类小肠类器官的研究表明 SARS-CoV-2 在肠细胞中复制。因此局部病毒复制可能会扰乱当地生态系统导致肠道微生物群组成和功能发生变化。 ACE2表达下调与肠道微生态变化 病毒刺突蛋白与细胞表面受体血管紧张素转换酶 II (ACE2) 的结合导致后者的表达下调。关于 ACE2 在维持肠道微生物生态中的关键作用通过氨基酸运输故障、色氨酸缺乏和抗菌肽产量减少SARS-CoV 期间缺乏可用的 ACE2 很可能-2感染在生态失调中起着至关重要的作用。 06呼吸道病毒引起的肠道微生物群变化对疾病结果的影响 粪菌移植实验表明从流感 (H7N9) 感染后幸存的小鼠中收集的肠道微生物群可以为受到 IAV 攻击的受体未接触过的小鼠提供保护。这种保护作用是否适用于其他 IAV 亚型和其他呼吸道病毒尚不清楚值得未来研究。因此呼吸道病毒感染引起的肠道微生物群组成和功能活动的改变可能会产生有益的影响。然而如下所述急性呼吸道病毒感染引起的菌群失调也会导致有害影响并参与感染的结果。 ▼对肠道稳态的影响 肠道微生物群对于维持上皮完整性和调节性 T 细胞的发育至关重要。这一关键作用主要取决于微生物群的代谢物。 在稳态期间肠道发挥相对抗炎的免疫状态 肠道微生物群的扰动会导致多种肠道疾病例如炎症性肠病、肠易激综合征、乳糜泻和结直肠癌。根据这些观察结果研究人员调查了病毒性呼吸道感染期间观察到的肠道菌群失调对肠道稳态和功能可能产生的负面影响。 病毒性呼吸道感染对肠道的影响 如上所述病毒性呼吸道感染包括 IAV、RSV 和冠状病毒感染可诱发胃肠炎样症状如腹痛、恶心、呕吐、腹泻。 感染 IAV 的小鼠出现肠道损伤包括结肠长度缩短炎症标志物、小肠粘膜层消失和轻度腹泻。同时观察到炎症细胞因子和 IFN 刺激基因的 mRNA 表达增强。 肠道屏障的破坏 肠道的一个重要特征是其屏障功能在健康条件下这可以防止微生物成分的过度扩散。许多疾病与屏障功能破坏有关从而导致细菌移位、全身炎症和休克。IAV 对肠道屏障特性的影响值得深入研究。就RSV而言除了粪便中脂质运载蛋白2肠道炎症标志物水平升高之外在小鼠模型中没有观察到明显结肠炎症的组织学证据。 肠道菌群改变可能是炎症的结果也可能是炎症的原因 人们可能会质疑在病毒性呼吸道感染的情况下微生物群的改变是否会引发肠道炎症或者炎症是否会导致菌群失调。这是一个“先有鸡还是先有蛋”的情况。如上所述炎症可能会影响肠道微生物群的组成。另一方面失调的微生物群可能直接引发和维持肠道疾病。 事实上IAV 感染期间的抗生素治疗以限制肠杆菌科细菌的增加可以减轻肠道炎症。此外粪便移植实验表明经历过 IAV 的微生物群触发了辅助 T17 细胞的局部积累随后引起肠道炎症。 与肠杆菌科细菌一样粘液降解细菌例如瘤胃球菌和阿克曼氏菌也可能是肠道炎症维持和/或放大的重要因素。事实上已知这些细菌会侵蚀结肠粘膜并促进肠腔细菌与肠上皮之间的相互作用。反过来这会导致炎症和屏障功能受损。 总体而言病毒性呼吸道感染可能通过改变共生体平衡来影响肠道稳态。肠道疾病的性质以及感染对肠道生理学例如摄入的食物和液体的消化和吸收、代谢和免疫稳态的影响仍有待详细分析。 病毒性呼吸道感染后肠道功能的改变可能会对健康产生直接和长期的影响。例如肠道屏障对于维持体内平衡至关重要任何扰动都可能导致细菌成分的系统性传播从而导致有害的健康结果。 ▼继发性肠道感染的后果 肠道微生物群通过直接微生物拮抗和刺激宿主效应反应例如抗菌肽来局部控制病原性感染至关重要。生态失调会增加发生肠道细菌感染的风险。动物模型实验表明IAV 增强了肠沙门氏菌Thyphimurium 继发肠道感染的易感性。这种增强至少部分归因于 I 型干扰素以及相关的抗菌肽和炎症细胞因子释放的减少。 肠道微生物群多样性的减少也可能与继发性肠道感染有关例如在小鼠系统中分段丝状细菌已知在 T 辅助细胞 17 介导的免疫反应中很重要的比例在 IAV 感染期间下降。 与此同时SCFA 生产者比例的下降对于继发性肠道感染可能很重要。已知这些脂肪酸可以控制肠道微生物群的平衡并防止肠道病原体如粪肠球菌和鼠伤寒沙门氏菌的发展。 IAV 感染期间口服补充 SCFA 是否可以降低继发肠道感染仍有待观察。 ▼肺部细菌重复感染的后果 呼吸道病毒感染的主要并发症之一是继发细菌感染的易感性增加主要是由肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌和流感嗜血杆菌引起的继发细菌感染。这种并发症主要影响儿童和老年人并导致流行病和大流行期间观察到的发病率和死亡率过高。动物模型实验表明敏感性增强部分是由于抗菌先天免疫反应受损。 健康的肠道微生物群在肺部免疫中具有有益的生理作用包括在控制肺炎链球菌或金黄色葡萄球菌等机会性细菌的发育方面发挥积极作用。 研究了流感感染期间肠道微生物群的扰动可能增加肺部细菌重复感染发生率的可能性。事实上粪菌移植实验表明IAV 条件下的微生物群损害了肺部对肺炎球菌感染的防御能力。 从机制上讲乙酸盐微生物群产生的主要短链脂肪酸产量的下降影响了肺泡巨噬细胞的杀菌活性。在流感和肺炎球菌双重感染的情况下补充乙酸盐可以降低细菌负荷减少肺部疾病并提高生存率。因此流感期间肠道微生物群的变化以及 SCFA 产生的减少与细菌重复感染有关。该领域的进一步研究可能有助于定义预测标记例如系统性 SCFA和/或开发针对细菌重复感染的治疗方法例如通过益生元和/或益生菌利用肠道微生物群的力量。 值得注意的是除了肠道微生物群之外与急性病毒性呼吸道感染相关的呼吸道微生物组成和功能的变化也可能在细菌重复感染中发挥重要作用。这种局部生态失调可能会改变微生物间相互作用的动态从而增强潜在致病细菌物种的增殖。局部微生物代谢输出的变化也可能降低肺部对继发细菌感染的防御能力。 总的来说病毒性呼吸道感染至少是流感期间的肠道菌群失调会影响肺部的细菌重复感染。微生物变化是否会影响病毒性呼吸道感染期间的其他疾病结果例如急性呼吸窘迫综合征、脓毒症和多器官功能障碍仍然是一个悬而未决的问题。 07结 语 流感和其他呼吸道病毒感染后常常导致细菌性肺炎这种现象在历史和现在上已造成大量死亡。病毒感染能导致呼吸道结构和功能的损伤改变呼吸道的微生物组增加细菌的侵袭和定植机会从而促进细菌性肺炎的发生。研究表明病毒感染不仅影响上呼吸道URT的微生物群落结构而且还可能促进下呼吸道LRT的细菌定植从而增加了肺炎的风险。尽管在临床上普遍使用抗生素以防治细菌性并发症但病毒与细菌之间的相互作用仍可能在病程中发挥作用。 呼吸道病毒感染后引发细菌性肺炎的机制是复杂的涉及宿主免疫系统的变化、微生物组的改变以及病原体之间的相互作用等因素。以下是一些可能的机制 1 免疫系统损伤 病毒感染如流感病毒或冠状病毒感染会损伤宿主的免疫系统特别是呼吸道黏膜的屏障功能和局部免疫应答。这使得细菌更容易侵犯和定植在下呼吸道从而导致细菌性肺炎。 2 微生物组改变 病毒感染可以改变呼吸道的微生物群落结构这可能破坏了正常的微生物群平衡使得某些致病细菌如肺炎链球菌、葡萄球菌和流感嗜血杆菌得以增殖和引起感染。 3 病原体协同作用 一些研究表明病毒和细菌之间可能存在协同作用病毒感染可能会促进细菌的黏附和侵袭能力或者细菌可能利用病毒感染后宿主免疫应答的变化来促进自己的生长。 4 炎症反应 病毒感染引起的炎症反应可能会损害呼吸道的细胞导致细胞死亡和组织损伤这为细菌提供了更多的营养物质和一个更易于感染的环境。 5 抗生素使用 在治疗病毒感染的过程中过度或不当使用抗生素可能会导致抗生素敏感的细菌被清除而抗生素耐药的细菌得以生长这可能增加了细菌性肺炎的风险。 6 肠道微生物组的改变 感染促进了潜在有害细菌种类的出现例如γ变形菌门和粘液降解细菌的成员。相反感染会抑制促进健康的细菌如乳酸杆菌、双歧杆菌和分段丝状细菌的生长。与此同时全身炎症细胞因子、食欲不振纤维减少、氧水平变化和上皮代谢改变会破坏肠道微生物群的组成和功能。 7 宿主因素 宿主的年龄、基础疾病、免疫状态等因素也会影响病毒感染后细菌性肺炎的风险。 8 继发细菌感染 在病毒性疾病的紧急情况下注意力最初集中在原发感染的临床管理上但必须考虑患者在初次感染期间或之后发生的继发细菌感染。此外混合感染同时感染另一种病毒或细菌病原体也可能发生并最终导致相同的结果患者患有由两种不同病原体引起的并发症。 未来诊断细胞性肺炎的项目通常需要综合临床表现、影像学检查以及微生物学检测。微生物学检测可能包括痰液培养、血液培养、支气管肺泡灌洗液BAL或粪便培养或分子检测。这些检测有助于确定引起肺炎的具体细菌种类并为抗生素的选择提供指导。 在干预和管理方面预防继发性感染策略包括 改善免疫力 确保患者获得适当的营养和休息以支持免疫系统的正常功能。对于易感人群如慢性疾病患者应考虑接种针对特定细菌的疫苗如肺炎球菌疫苗。 这些营养素在免疫健康中发挥作用 β-胡萝卜素 β-胡萝卜素存在于植物性食品中如红薯、菠菜、胡萝卜、芒果、西兰花和西红柿。 维生素 C 富含维生素 C 的食物包括柑橘类水果、浆果、甜瓜、西红柿、青椒和西兰花。 维生素 D 维生素 D 存在于富含脂肪的鱼类和鸡蛋中。牛奶和 100% 添加维生素 D 的果汁也是很好的来源。 锌 锌更容易从牛肉和海鲜等食物中吸收但也存在于植物性来源中包括麦芽、豆类、坚果和豆腐。 益生菌 益生菌是促进健康的好细菌。发酵乳制品例如酸奶和发酵食品例如开菲尔和泡菜中有。 蛋白质 蛋白质来自动物和植物来源包括牛奶、酸奶、鸡蛋、牛肉、鸡肉、海鲜、坚果、种子、豆类和扁豆。 抗病毒 对于治疗某些呼吸道病毒感染如病毒感染可以使用抗病毒药物来减少病毒复制从而降低继发细菌性肺炎的风险。 维持微生物群平衡 使用益生菌和益生元可能有助于保持或恢复正常的微生物和落平衡。这可以通过补充或通过饮食调整来实现例如增加富含纤维或益生菌的食物来促进有益菌的生长。 抗生素的审慎慎用 在病毒感染的患者中不宜过分使用抗生素以免造成不必要的抗生素抗性和抗生素失衡。只有在明显有细菌感染或经过微生物学验证的情况下才应使用抗生素。 症状管理和支持治疗 针对呼吸道病毒感染的症状进行管理如使用退热药、镇咳药和解痉药。同时保持良好的水分和营养平衡维生素B族氨基酸等必要时提供氧气支持。 监测和早期识别 对于高风险患者群体应进行定期监测以便于早期识别继发性细菌性肺炎的迹象及时进行干预。 通过这些策略的综合应用可以有效地管理呼吸道病毒感染后的气道和肠道微生物组的变化并预防继发性肺炎的发生。然而每个患者的具体情况可能不同因此治疗计划应根据个体的需求和病情进行个性化调整。 主要参考文献 Hanada S, Pirzadeh M, Carver KY, Deng JC. 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